摘要:目的通过敲除伤寒沙门菌与体内生存相关的基因构建减毒株。方法采用同源重组方法进行基因敲除,将涉及铁摄取的外膜转运蛋白编码基因iroN、fepA、cirA全部敲除。采用小鼠感染模型测定野生株和突变株的毒力水平,采用概率单位加权回归法计算半数致死量(LD50)。结果采用同源重组方法将3个基因一一敲除,成功构建三基因敲除株。贫铁培养基中的生长曲线显示突变株生长较野生株明显缓慢;以动物模型检测的毒力水平显示,野生株和突变株的LD50分别为3.64×10CFU和3.56×10^6CFU。结论伤寒沙门菌外膜转运蛋白编码基因iroN、fepA、cirA敲除后病原菌毒力显著减低,为减毒疫苗的后续评价奠定了基础。
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