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作者:吴凯峰; 张競之; 查何; 刘雁; 童华波; 潘卫; 王正蓉 单位:贵州省遵义市第一人民医院/遵义医学院第三附属医院检验科; 563000; 贵州医科大学检验医学院; 贵阳550004
摘要:目的研究肺炎链球菌spr1759(LytR)蛋白的基本理化性质,初步分析预测该蛋白的结构与功能。方法利用Bioedit、TMHMM、TargetP和ExPASy等多种生物信息学软件对肺炎链球菌spr1759蛋白进行分析,并对其功能预测。利用TMHMM软件对比肺炎链球菌spr1759蛋白与炭疽芽孢杆菌BAS5115蛋白和枯草芽孢杆菌DJ97_1211二级结构差异;利用Megalign软件分析它们之间的氨基酸序列相似性。结果肺炎链球菌spr1759蛋白为一亲水性蛋白,其相对分子质量为37.56×10^3,等电点为5.11,存在1个跨膜区。肺炎链球菌spr1759蛋白属于LytR_cpsA_psr超家族,可能具有阴离子细胞壁多聚物合成相关酶的功能。与其他细菌蛋白比对发现,该蛋白与炭疽芽孢杆菌BAS5115蛋白和枯草芽孢杆菌DJ97_1211具有相似的跨膜结构域,均含有1跨膜结构;肺炎链球菌spr1759蛋白与炭疽芽孢杆菌BAS5115蛋白和枯草芽孢杆菌DJ97_1211蛋白氨基酸序列具有较高同源性,全长序列相似性分别为35.7%和32.5%。结论肺炎链球菌LytR蛋白是具有跨膜结构的亲水性蛋白,可能具有阴离子细胞壁多聚物合成相关酶学功能。
作者:吴少璞; 祁亚伟; 李学; 杨红旗; 马建军 单位:河南省人民医院神经内科; 郑州450002
摘要:目的研究巨噬细胞介导的胶质细胞源性神经营养因子(GDNF)基因治疗对帕金森病小鼠临床症状,以及对黑质酪氨酸羟化酶(TH)阳性神经元损害和胃肠功能障碍的影响。方法 60只小鼠分为对照组、实验组和健康组。实验组小鼠接受表达GDNF的慢病毒骨髓干细胞转导,对照组和健康组小鼠注射生理盐水。移植后对照组和实验组通过MPTP建立帕金森模型,健康组注射生理盐水。比较3组小鼠建模后行为学变化、TH阳性(H+)多巴胺能神经神经元细胞免疫组织化学染色结果和神经元数目数目、体质量变化、胃排空率和肠推进率。结果 GDNF在移植后的小鼠中成功表达。实验组小鼠爬杆时间明显长于健康组并明显短于对照组(P〈0.05),实验组小鼠转棒停留时间明显短于健康组并明显长于对照组(P〈0.05)。对照组、实验组和健康组小鼠的(TH+)多巴胺能神经神经元数目分别为:(8 610.26±833.64)、(1 117.54±1 037.18)、(1 369.87±1 440.16)×10^-4/μm^3,差异有统计学意义(P〈0.01);实验组小鼠黑质中的TH+多巴胺神经元纤维比对照组更密、颜色更深,比健康组更疏、颜色更浅。造模前后对照组和实验组小鼠体质量明显下降;实验组小鼠体质量、胃排空率、小肠推进率明显低于健康组且高于对照组(P〈0.05)。结论 GDNF基因疗法能够明显改善帕金森病小鼠的运动协调能力,修复TH+神经元细胞损伤,改善胃肠道功能障碍。
作者:李大玉; 余春波; 朱欣婷; 刘喜平; 范芳; 李长福 单位:遵义医学院生化教研室; 贵州遵义563000
摘要:目的研究DNA依赖蛋白激酶催化亚基(DNA-PKcs)基因沉默后对肝癌耐药细胞Bel7402/5-Fu细胞凋亡的影响。方法实验分为空白对照组、脂质体对照组、NC对照组、siDNA-PKcs实验组。采用噻唑蓝(MTT)法检测耐药细胞Bel7402/5-Fu的耐药性;采用阳离子脂质体法将siDNA-PKcs寡核苷酸片段转染Bel7402/5-Fu细胞;Real-time PCR和Western blot分别检测细胞DNA-PKcs mRNA及蛋白的表达情况;倒置荧光显微镜下观察细胞形态变化(Hoechst33342染色法);流式细胞术检测细胞凋亡情况(AnnexinV/PI双染法);Western blot检测B细胞淋巴瘤-2相关x蛋白(Bax)、B细胞淋巴瘤/白血病-x基因长片段(Bcl-xl)蛋白的表达情况。结果 MTT检测Bel7402/5-Fu细胞的半抑制浓度(IC50)明显增高,耐药细胞Bel7402/5-Fu的耐药指数为13.13;DNA-PKcs的mRNA与蛋白表达水平明显减少,设计的siDNA-PKcs特异序列能有效沉默细胞DNA-PKcs的表达;Hoechst-33342染色检测结果显示siDNA-PKcs实验组细胞体积缩小、细胞核边集、呈亮蓝色;流式细胞术检测结果显示,siDNA-PKcs实验组细胞凋亡率比其余组增加(P〈0.01);Western blot检测结果显示siDNA-PKcs实验组Bax蛋白表达水平比其余组高,Bcl-xl蛋白表达水平比其余组低(P〈0.01)。结论siDNA-PKcs能诱导肝癌耐药细胞Bel7402/5-Fu细胞凋亡,并能上调促凋亡蛋白Bax的蛋白表达水平,抑制抗凋亡蛋白Bcl-xl的蛋白表达水平。
作者:林文东; 杨维群; 施水液; 张美佳; 程晶; 洪建兵 单位:泉州医学高等专科学校基础医学部; 福建泉州362000; 福建省晋江市中西医结合医院内科; 362200; 福建省泉星生物有限公司; 福建南安362300
摘要:目的探讨秋龙筋中药制剂对链脲佐菌素(STZ)诱导糖尿病大鼠的降糖作用及作用机制,为进一步深入开发提供依据。方法将24只大鼠分为正常组、模型组、阳性药组及实验组,模型组、阳性药组及实验组使用STZ诱导造模。正常组及模型组给予生理盐水,阳性药组给予盐酸二甲双胍,实验组给予秋龙筋中药制剂干预。给药结束后检测血清学指标;采集肝脏组织,检测肝糖原水平。结果实验组大鼠血中低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、血清总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、空腹血糖(FBG)、丙二醛(MDA)、游离脂肪酸(FFA)、糖化血红蛋白(GHb)、一氧化氮(NO)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平明显低于模型组,高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽(GSH)、肝糖原水平明显高于模型组(P〈0.05)。结论采用秋龙筋中药制剂对STZ诱导糖尿病大鼠干预后,可有效降低其体内血糖水平,提高胰腺β细胞功能。
作者:陈晓; 高英芳; 张志敏; 张雪玲; 王岩; 郝红娟 单位:河北省石家庄市第四医院妇产科; 050011
摘要:目的研究新型抗瘤中药制剂青蒿琥酯(ART)对T淋巴细胞表面免疫因子的影响。方法噻唑蓝(MTT)法筛选对卵巢癌3AO细胞增殖无明显影响的最高ART浓度。收集经ART预处理后的3AO细胞培养上清液(ART-S组)及连续两次再培养上清液(ART-S1组和ART-S2组),以不经ART作用的相应同步培养的3AO细胞培养上清液作对照(Con-S组、Con-S1组、Con-S2组),以完全培养基代替3AO细胞培养上清液组为正常对照组(Con组),流式细胞计数法分析各组上清液对T细胞表面CD3ε^+、CD3ε^+ζ^+、IL-2Rα^+免疫功能指标的影响。结果对3AO细胞增殖无明显影响的最高ART浓度为12.50 mg/L。Con组的CD3ε^+、CD3ε^+ζ^+、IL-2Rα^+细胞表达阳性率分别为(86.07±10.05)%、(25.09±5.84)%、(39.11±5.83)%。Con-S组3项免疫指标明显受抑制,抑制率分别为(50.17±8.02)%、(87.51±9.17)%、(64.84±9.74)%。ART直接作用后可明显下调单纯的3AO肿瘤细胞所致的3项T细胞免疫功能抑制。结论青蒿琥酯对人卵巢癌3AO细胞所致T淋巴细胞免疫功能有一定的逆转作用。
作者:彭泽艳; 董舒阳; 周华东 单位:蚌埠医学院研究生院; 安徽蚌埠233030; 陆军军医大学大坪医院野战外科研究所神经内科; 重庆400042
摘要:目的探讨脑白质病变(WML)与帕金森病(PD)患者认知功能障碍的相关性。方法纳入60岁以上的PD患者412例,收集患者年龄、临床特征和磁共振WML影像学资料,并进行认知功能障碍的神经心理学评估。WML的严重程度按Fazekas视觉模拟评分法分为0~3级。认知功能障碍分为轻度认知功能障碍(MCI)和痴呆。根据PD患者的认知功能状态,分为PD认知功能正常组(PD-NC组,n=329)、帕金森轻度认知功能障碍组(PD-MCI组,n=46)及帕金森痴呆组(PDD,n=37)。探讨PD患者认知功能障碍的危险因素,以及WML严重程度与PD患者认知功能障碍之间的关系。结果在调整了混杂因素后,多因素Logistics回归分析结果显示PD患者的年龄、病程、低教育水平、高血压、糖尿病、高脂血症、UPDRS partⅢ评分及改良H&Y分期数值及WML是PD发生认知功能障碍的危险因素(P〈0.05)。同时Logistics回归分析结果显示,WML Fazekas 3级与PD-MCI明显相关(OR=2.52,95%CI:1.83~3.21),同时WML Fazekas 2级及Fazekas 3级均与PDD明显相关(2级,OR=2.27,95%CI:1.58~2.89;3级,OR=2.86,95%CI:1.94~3.87)。结论 WML是PD患者的认知功能障碍一种重要的危险因素,同时WML的严重程度与PD患者的认知功能障碍发生存在明显相关性。
作者:赵心灵; 曾勇; 于玲; 李明; 李婷; 张缙涛; 王婷婷; 熊鹏 单位:昆明医科大学第一附属医院精神科; 昆明650032
摘要:目的探讨以阴性症状为主的精神分裂症血清磷酸化雷帕霉素靶蛋白(p-mTOR)、白细胞介素10(IL-10)水平变化及其与精神分裂症的相关性。方法采用ELISA测定56例以阴性症状为主的首发未服药精神分裂症和56例健康对照者血清中p-mTOR、IL-10水平,采用阳性与阴性症状量表(PANSS)评定精神分裂症患者症状。结果研究组血清p-mTOR值高于对照组[(4.38±1.30)ng/L vs.(3.88±0.76)ng/L],差异有统计学意义(P〈0.05);p-mTOR与PANSS阴性症状评分呈正相关(r=0.283,P〈0.05)。而研究组血清IL-10水平与对照组比较差异无统计学意义,但是与PANSS总分呈负相关(r=-0.507,P〈0.01)。研究组血清p-mTOR与IL-10水平呈正相关(r=0.437,P=0.001)。健康组血清p-mTOR与IL-10水平呈负相关(r=-0.403,P=0.002)。结论 mTOR信号通路活性增高可能与阴性症状为主精神分裂症的病理机制相关,mTOR活性越高,阴性症状越严重;mTOR信号通路激活后还可能与IL-10水平相关。
作者:尚彪; 董文斌; 刘娟; 白静; 田鹏; 丁小燕 单位:西南医科大学附属医院新生儿科; 四川泸州646000; 四川省南充市中心医院新生儿科; 637000
摘要:目的探究枸橼酸咖啡因治疗新生儿呼吸窘迫综合征(NRDS)的疗效。方法将收治的90例NRDS患儿分为枸橼酸咖啡因组和氨茶碱组、对照组,每组各30例,在使用肺表面活性物质(PS,固尔苏)替代治疗及机械通气等基础上,咖啡因组用枸橼酸咖啡因药物进行治疗,氨茶碱组用氨茶碱药物进行治疗,对照组仅给予基础治疗。治疗前后检测患者的呼吸力学变化,治疗后仍无效的患者给予持续的常频机械通气或鼻持续气道正压通气(nCPAP)治疗。结果咖啡因组整体有效率达到86.7%,氨茶碱组整体有效率为73.3%,对照组整体有效为56.7%,咖啡因组明显高于氨茶碱组及对照组(P〈0.05);咖啡因组与氨茶碱组、对照组相比,内源性呼气末正压、气道阻力均明显较低(P〈0.05),咖啡因组静态顺应性水平明显高于氨茶碱组(P〈0.05);咖啡因组机械通气和nCPAP治疗的时间明显短于氨茶碱组及对照组(P〈0.05);治疗后,3组的PaCO2和PaO2比较差异有统计学意义(P〈0.05),咖啡因组PaCO2最低,PaO2最高。结论使用枸橼酸咖啡因药物方法联合肺表面活性物质治疗呼吸窘迫的新生儿对呼吸力学影响有效。
作者:宋大龙; 杨通印; 胡建新; 刘军; 王元林; 徐述雄; 单刚; 王振兴; 孙兆林 单位:贵州省人民医院泌尿外科; 贵阳550002; 贵州大学; 贵阳550025; 贵州省人民医院病理科; 贵阳550002
摘要:目的探讨经荧光膀胱镜2μm激光治疗非肌层浸润性膀胱癌的临床疗效。方法 112例非肌层浸润性膀胱癌患者分为观察组(荧光膀胱镜)和对照组(白光膀胱镜)各56例。观察组56例非肌层浸润性膀胱癌患者在5-氨基乙酰丙酸(5-ALA)诱导下行荧光膀胱镜检查,用2μm激光对于肿瘤区域进行切除,对红色可疑癌变区域在活检后予以切除。对照组56例非肌层浸润性膀胱癌患者行经尿道膀胱肿瘤电切术(TURBT)治疗。观察两组患者手术时间,术中出血量,闭孔神经反射,膀胱穿孔,尿管留置时间,肿瘤检出率,病理分期和分级,术后不同时期肿瘤的复发等指标。随访观察至术后60个月。结果观察组13例患者术中在肿瘤周边区域出现红色可疑癌变区域,9例患者术后病理为低度恶性潜能尿路上皮乳头状瘤(PUNLMP),2例患者术后病理为原位癌。对照组在肿瘤周边区域发现3例PUNLMP,未发现原位癌。观察组肿瘤检出率与对照组相比高14.2%。观察组患者闭孔神经反射、膀胱穿孔情况明显优于对照组(P〈0.05)。观察组患者随访至术后24个月时膀胱肿瘤复发与对照组比较差异有统计学意义(P〈0.05)。结论经荧光膀胱镜2μm激光治疗非肌层浸润性膀胱癌的临床疗效较好。
作者:张萍; 樊海宁; 王海久; 王展; 乜国雁; 张朝霞; 王花 单位:青海卫生职业技术学院; 西宁810000; 青海大学附属医院肝胆胰外科; 西宁810001; 青海省包虫病研究重点实验室; 西宁810001; 青海省人民医院泌尿外科; 西宁810007
摘要:目的研究肝泡球蚴(HAE)组织中基质金属蛋白酶-2(MMP-2)和CD34的表达,探讨二者在血管生成和侵袭转移中的作用。方法采用免疫组织化学SP法检测MMP-2和CD34在HAE组织及距病灶5cm以外的正常肝组织标本(各40例)的表达及其与临床病理特性之间的关系。比较两组差异并分析MMP-2和CD34的相关性。结果 MMP-2和CD34的阳性表达程度以HAE病灶与正常肝组织交界的边缘带最明显。HAE边缘带组织中MMP-2、CD34阳性表达率60.0%和62.5%,明显高于正常肝组织阳性表达率(27.5%和25.0%),差异有统计学意义(P〈0.01);在发生转移的HAE边缘带组织中MMP-2、CD34的阳性表达率78.9%和78.9%,明显高于未发生转移的阳性表达率(42.9%和47.6%),差异有统计学意义(P〈0.05)。MMP-2和CD34的表达呈正相关(r=0.442,P〈0.01)。结论 HAE病灶边缘带组织MMP-2和CD34的表达可能参与了血管的新生,并与HAE的侵袭转移有关系。
作者:付新洒; 曹彦洋; 李冠雪; 陈芳; 王晓琪; 杨梦雪; 蔡智谋; 钟庆雯; 文忠; 申聪香 单位:南方医科大学珠江医院耳鼻咽喉头颈外科; 广州510282; 中国人民解放军第四一一医院耳鼻咽喉科; 上海200081; 南方医科大学珠江医院小儿耳鼻咽喉科; 广州510282
摘要:目的探讨鼻咽癌患者外周循环血人端粒酶逆转录酶(hTERT)mRNA和细胞角蛋白19(CK19)mRNA表达与肿瘤微转移的相关性。方法采用实时荧光定量PCR技术(qRT-PCR)定量检测44例鼻咽癌患者治疗前后外周循环血hTERT mRNA及CK19mRNA定量表达,并分析其与临床病理特征的关系,同时以20例健康体检者作为对照。结果对照组外周血中CK19mRNA相对表达量为0.85±0.50,鼻咽癌患者外周血中CK19mRNA水平为10.97±4.60,差异有统计学意义(t=-14.39,P〈0.01);健康体检者外周血中hTERT mRNA相对表达量为1.09±0.40,鼻咽癌患者外周血中hTERT mRNA水平为10.45±3.81,差异有统计学意义(t=-16.64,P〈0.01)。鼻咽癌患者外周血hTERT mRNA和CK19mRNA的表达与临床分期、T分期、N分期、M分期有相关性(P〈0.05)。治疗后鼻咽癌患者hTERT mRNA的表达量由10.75±3.81降低至5.46±2.00,而CK19mRNA的表达量(5.63±1.91)较治疗前(10.97±4.60)亦明显下降(P〈0.01)。结论鼻咽癌外周血hTERT mRNA和CK19mRNA的表达有可能作为预测外周血肿瘤细胞微转移和判断疗效的指标之一。
作者:王大杰; 孙万峰; 张国培; 崔婷; 顾行军; 王峰 单位:江苏省盐城市第三人民医院心内科; 224005
摘要:目的探讨2型糖尿病合并冠心病患者在冠状动脉药物洗脱支架(DES)植入后使用非顺应性球囊行后扩张治疗的近期临床疗效和安全性。方法回顾性分析2014年1月至2016年6月该院行冠状动脉介入治疗(PCI)的2型糖尿病合并冠心病(除外急性心肌梗死病例)患者82例,根据DES支架植入后是否采用非顺应球囊后扩张分为后扩张组及非后扩张组。比较两组患者的临床特征,糖化血红蛋白,手术入路,冠状动脉病变情况,DES植入情况,术中TIMI血流,住院期间急性和亚急性血栓、恶性心律失常,住院期间和PCI术后9个月的出血事件、主要心脏不良事件(MACE)、左室射血分数及PCI术后9个月的晚期血栓发生、支架内再狭窄。结果后扩张组手术时间[(1.45±0.38)h]大于非后扩张组[(1.27±0.33)h](P〈0.05),住院期间急性和亚急性血栓发生率和MACE发生率低于非后扩张组(P〈0.05)。后扩张组PCI术后9个月的支架内再狭窄率低于非后扩张组(P〈0.05)。结论对2型糖尿病合并冠心病患者在DES植入后使用非顺应性球囊行后扩张治疗安全,可改善患者临床预后。
作者:许建华; 邱雪松; 黄文忠 单位:重庆市渝北区人民医院耳鼻咽喉科; 401120; 重庆市渝北区人民医院病理科; 401120; 重庆市渝北区人民医院麻醉手术室; 401120
摘要:目的比较显微支撑喉镜下手术治疗和电子喉镜下手术治疗声带白斑的效果。方法选择该院2006年10月至2016年10月接收的声带白斑患者68例,根据治疗方法将其分为对照组和研究组,各34例。研究组接受显微支撑喉镜下手术治疗,对照组接受电子喉镜下手术治疗,术后1个月、3个月、6个月、1年定期随访,观察患者声嘶改善状况,声带恢复情况及有无复发等。结果研究组治疗总有效率和伴有不典型增生的声带白斑治疗总有效率方面分别为94.12%、93.33%,对照组分别为73.53%、62.50%,研究组均高于对照组,差异有统计学意义(P〈0.05)。结论显微支撑喉镜治疗声带白斑的疗效较电子喉镜更佳,尤其是治疗声带白斑伴不典型增生倾向患者效果更显著。
作者:李文哲; 孙建华; 刘斌; 庞巨涛; 陈景环 单位:河北省衡水市人民医院运动医学科; 053000; 河北省衡水市人民医院康复医学科; 053000
摘要:目的探讨关节镜下微骨折术对膝关节软骨损伤的近期疗效。方法研究对象选自该院2015年4月至2017年2月收治的114例膝关节软骨损伤患者,按照随机数字表法将其分成两组,每组57例。其中观察组行关节镜下微骨折术治疗,对照组行关节清理术治疗,两组术后均行康复训练,比较两组近期疗效,以及手术前后关节液内白细胞介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平变化情况。结果观察组术后总有效率为94.74%,与对照组(75.44%)比较明显上升(P〈0.01)。术后3个月两组Tegner评分及HSS评分与术前相比均有明显上升(P〈0.01),观察组术后3个月Tegner评分[(4.63±0.71)分]及HSS评分[(86.23±10.24)分]明显高于对照组同期(P〈0.01)。术后3个月两组关节液内IL-1β、TNF-α水平与术前相比均有明显降低(P〈0.01),观察组术后3个月关节液内IL-1β[(9.17±2.03)pg/mL]、TNF-α水平[(10.17±2.75)pg/mL]明显低于对照组同期(P〈0.01)。观察组并发症发生率为0,与对照组(7.02%)相比明显降低(P〈0.05)。结论关节镜下微骨折治疗膝关节软骨损伤,能有效降低关节液内IL-1β、TNF-α水平,近期临床疗效满意。
作者:杜静; 何勇川; 谭春华 单位:重庆爱尔眼科医院小儿眼科; 400020
摘要:目的评价A型肉毒杆菌毒素(BoNT-A)治疗早期急性共同性内斜视(ACE)的疗效。方法回顾2017年1月至2018年1月在该院治疗的8例早期ACE成人患者,发病时间不超过半年,平均年龄(22.9±5.83)岁。所有患者在明确诊断后,在手术室表面麻醉下接受BoNT-A注射治疗。根据患者术前检查斜视度的差异将不同剂量的BoNT-A注射入其斜视眼的内直肌肌腹内。于治疗后1d、1周、1个月、3个月、6个月、12个月对患者复视和斜视改善情况定期门诊随访,随访三棱镜斜视度、同视机和Hess屏等检查结果。结果患者治疗后1d至2个月复视消失、眼位恢复正位(〈±10PD),平均起效时间7~14d,效果维持最长1年以上,治愈率100%。其中3例病例在早期出现轻中度上睑下垂,1例病例出现过矫和小于10PD的垂直斜视及球结膜下少量出血等并发症,均在2个月内消退。1例病例在治愈1年后复发,接受再次治疗很快治愈。结论用BoNT-A注射治疗早期ACE效果良好。