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作者:陈益国; 邓林强; 陈会; 熊章华; 桂晓美; 曾黎峰; 喻金梅 单位:江西省人民医院检验科; 南昌330008; 江西省妇幼保健院肿瘤科; 南昌330006
摘要:目的研究TLR2激动剂Pam3Csk4预处理后耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)攻击小鼠肾脏的保护作用。方法将雌性SPF级昆明小鼠共分为未处理正常小鼠组、生理盐水组和Pam3Csk4处理组3组,每组4只。Pam3Csk4处理组用Pam3Csk4尾静脉注射预处理小鼠24h,每只50μg,分别于MRSA感染3、7d后观察肾脏脓肿的形成情况;流式法检测MRSA攻击12h后肾脏中性粒细胞的浸润;Q-PCR法检测MRSA攻击6、12h后小鼠肾脏肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素(IL)-6、IL-1和IL-10的基因表达,以及高迁移蛋白B1(HGMP1)、热休克蛋白70(HSP70)、FcγⅢ受体(FcγRⅢ)、补体受体3(CR3)及趋化因子CXCL1/2受体的表达情况。结果与生理盐水组比较,Pam3Csk4预处理能抑制MRSA攻击小鼠后肾脓肿的形成,减少肾脏中性粒细胞的浸润(P〈0.01),降低趋化因子受体CXCL1/2基因的表达(P〈0.05);Pam3Csk4预处理小鼠肾脏TNF-α、IL-6和IL-1表达水平降低,而IL-10则增加(P〈0.05);HSP70和HGMP1基因在MRSA感染6h内两组比较差异无统计学意义(P〉0.05),但12h后HSP70和HGMP1基因均降低(P〈0.01);Pam3Csk4预处理小鼠肾脏CR3和FCγⅢ受体表达水平均高于生理盐水组(P〈0.05)。结论 Pam3Csk4预处理降低MRSA导致的炎性反应并对MRSA所致肾脓肿具有抑制作用。
作者:李楠静; 黄娟; 张又; 何菲 单位:成都中医药大学临床医学院; 成都610072; 四川省人民医院血液科; 成都610072; 四川大学华西医院生物治疗国家重点实验室; 成都610041
摘要:目的研究华蟾素对人胃癌SGC7901细胞增殖及Rho GTPase表达的影响。方法将人胃癌SGC7901细胞分为华蟾素组和对照组,利用Cell Counting Kit-8检测(0.5、1.0、1.5、2.0mg/mL)华蟾素组和对照组的人胃癌SGC7901细胞的增殖抑制情况,利用Western blot和RT-PCR分别检测不同浓度(0.5、1.0、2.0ng/mL)华蟾素组和对照组的人胃癌SGC7901细胞内Rho GTPase(RhoA、Cdc42、Rac1)蛋白和mRNA表达的水平。结果与对照组相比,0.5、1.0、1.5、2.0mg/mL华蟾素组对SGC7901细胞均具有增殖抑制作用(P〈0.05)。0.5、1.0、2.0mg/mL华蟾素组的SGC7901细胞内Rho GTPase(RhoA、Cdc42、Rac1)蛋白和mRNA表达明显降低且呈剂量依赖性(P〈0.05)。结论华蟾素抑制胃癌SGC7901的增殖的机制可能与下调Rho GTPase(RhoA、Cdc42、Rac1)信号通路的表达有关。
作者:杨平; 陈博; 贾贵清; 伍晓汀; 张祥运; 李卫 单位:四川省医学科学院/四川省人民医院城东病区胃肠外科; 成都610110; 安徽医科大学第一附属医院胃肠外科; 合肥246400; 四川省医学科学院/四川省人民医院胃肠外科; 成都610072; 四川大学华西临床医学院/华西医院胃肠外科; 成都610041
摘要:目的研究转染正常c-CBL基因后耐药胃肠道间质瘤(GIST)细胞在体外对甲磺酸伊马替尼作用的影响。方法选择的瘤源细胞来自1例29岁青年男性患者,诊断为小肠间质瘤复发伴腹腔转移。通过细胞爬片、Western blot、RT-PCR检测基因鉴定细胞。通过将携带正常c-CBL基因的反转录病毒载体转染耐药GIST细胞中,四唑盐比色法(MTT)测定转染前后耐药GIST细胞对甲磺酸伊马替尼药物敏感性。结果 Western Blot检测培养耐药GIST的C-kit稳定表达C-kit蛋白,基因测序显示耐药GIST细胞C-kit突变位点位于第9号外显子,通过检测显示培养耐药GIST保持了原有的生物学特性。甲磺酸伊马替尼对GIST细胞作用72h MTT实验结果显示:转染前耐药细胞在1.6μmol/L浓度时,抑制率未超过50%;然而转然后,在0.10μmol/L浓度抑制率达到76.5%,最佳浓度为0.10~0.20μmol/L,转染前后不同浓度的抑制率差异有统计学意义(P〈0.01)。结论通过转染正常c-CBL至耐药GIST细胞,增强了对甲磺酸伊马替尼的敏感性。
作者:黄洁; 李承红; 孟庆华; 王小江; 陈实; 石奕 单位:江汉大学附属医院/武汉市第六医院呼吸内科; 430016
摘要:目的探讨表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)对非小细胞肺癌(NSCLC)细胞系增殖凋亡、周期的作用机制。方法对数生长期NSCLC细胞系NCI-H1975和NCI-H520,分为空白对照组(0 mol/L EGCG)和不同剂量(20、40、80、160、320mol/L)EGCG组,分别处理作用24、48、72h,CCK-8法检测细胞凋亡率;细胞流式细胞术检测细胞凋亡和周期;Western blot检测细胞周期、凋亡相关蛋白表达及NF-kB/Bcl2和EGFR/ERK/AKT信号通路变化;细胞分为:Control siRNA组、EGFR siRNA组和EGFR siRNA+EGCG组,采用siRNA转染技术,分析下调EGFR对NF-kB/Bcl2和EGFR/ERK/AKT信号通路的影响。结果分组的相应浓度EGCG组NCI-H1975和NCI-H520细胞的增殖显著降低(P〈0.05),同时G1/G0细胞比例增高,G1/S期细胞比例下降(P〈0.05),CyclinD1、CyclinE、CDK6蛋白表达降低(P〈0.05),但对CDK4无明显影响(P〉0.05),同时细胞凋亡增多,Cleaved caspase 3和Cleaved caspase 9蛋白表达上调(P〈0.05)。P-P65、Bcl2、P-EGFR、P-AKT蛋白表达下调,Bax蛋白表达上调,但对P-ERK没有明显的影响。而EGCG+EGFR siRNA组,相比于EGFR siRNA组,明显降低各蛋白的表达,升高Bax蛋白(P〈0.05)。结论 EGCG下调NF-kB/Bcl2和EGFR/ERK/AKT信号通路抑制NCI-H1975和NCI-H520细胞增殖、促进凋亡,并阻断细胞周期。
作者:雷美清; 罗贤生; 王智明; 孙令凤; 杨晓阳; 余锋; 陈晓霞 单位:中南大学湘雅医学院附属海口市人民医院血液科; 570208
摘要:目的探讨粒细胞集落刺激因子(G-CSF)增强三氧化二砷(As2O3)诱导骨髓增生异常综合征(MDS)细胞株SKM-1细胞凋亡作用。方法将不同浓度G-CSF(10、20、40ng/mL)与SKM-1细胞共育48h,以不加G-CSF为空白对照组,碘化丙锭细胞核染色法结合流式细胞术分析细胞周期变化。继之以20ng/mL G-CSF预处理细胞24h,不加G-CSF组为对照组,然后将不同浓度的As2O3(2.5、5.0、10.0μmol/L)加入实验组和对照组共培养48h,分别采用Cell Counting Kit(CCK-8)检测细胞增殖和Annexin V/PI试剂盒结合流式细胞术检测细胞凋亡水平。结果 20ng/mL G-CSF为促进SKM-1细胞周期向S期转化的更好浓度(P〈0.05);CCK-8检测显示As2O3+G-CSF组较As2O3单药组抑制细胞生长更明显(P〈0.05);凋亡结果表明As2O3+G-CSF组细胞凋亡率高于As2O3组(P〈0.05)。结论 G-CSF动员SKM-1细胞进入S期可能是其增强As2O3的诱导凋亡作用的机制之一。
作者:屈春梅; 李红梅 单位:重庆市红十字会医院/江北区人民医院内分泌科; 400020; 重庆市红十字会医院/江北区人民医院儿科; 400020
摘要:目的研究柚皮素对早期糖尿病肾病模型小鼠db/db 24h尿清蛋白、血糖及其分子机制的影响。方法 15只4周龄雄性小鼠分为3组:5只db/m小鼠作为正常对照组,10只4周龄高血糖且无蛋白尿的db/db小鼠分别分到空白对照组和柚皮素组。其中柚皮素组小鼠进行柚皮素50mg·kg^-1·d^-1混悬液灌胃,空白对照和正常对照组小鼠均进行等体积的生理盐水溶液灌胃,直至空白对照组db/db小鼠尿清蛋白显著高于正常对照组,共治疗6周。检测体质量、血糖、24尿清蛋白,硝酸还原酶法检测血清一氧化氮(NO),分光光度法检测一氧化氮合酶(NOS)。结果空白对照组较正常对照组体质量、血糖、尿清蛋白、NO和NOS显著增高,而经柚皮素治疗后的柚皮素组较空白对照组病情减轻,血糖和尿清蛋白显著减轻,氧化应激相关因子NO和NOS也明显下降。结论柚皮素可缓解抑制糖尿病肾病小鼠尿清蛋白,其机制可能通过抑制NO和NOS拮抗氧化应激,从而对糖尿病肾病治疗具有一定作用。
作者:李杨; 张季; 杨思原; 谢琳 单位:云南省肿瘤医院/昆明医科大学第三附属医院肿瘤内科; 昆明650118; 云南省肿瘤医院/昆明医科大学第三附属医院乳腺科; 昆明650118
摘要:目的探讨miR-148a-3p在乳腺癌中的作用及可能的机制。方法根据人乳腺癌细胞株-7(MCF-7)细胞是否转染及是否存在miR-148a-3p的模拟物分为3个组:未转染组、miR-148a-3p对照组和miR-148a-3p转染组。通过实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测转染后miR-148a-3p在各组的信使RNA(mRNA)水平,运用四唑盐比色法(MTT)比较MCF-7细胞在3组的增殖情况,应用RT-qPCR检测各组神经母细胞瘤病毒性ras致癌因子的同原体(NRAS)的基因水平,应用Western blot检测各组RAS病毒致癌基因同源物NRAS的蛋白水平,应用流式细胞术检测各组细胞凋亡情况,应用双荧光素酶报告基因实验验证miR-148a-3p与NRAS之间的作用。结果过表达miR-148a-3p显著抑制乳腺癌细胞株MCF-7的增殖(P〈0.05),促进其凋亡(P〈0.05),降低NRAS基因和蛋白的表达(P〈0.05),双荧光素酶报告基因实验证明NRAS是miR-148a-3p的直接作用靶点。结论 miR-148a-3p可能通过靶向NRAS抑制乳腺癌MCF-7细胞的增殖,促进细胞凋亡。
作者:康小龙; 何承辉; 卢军; 刘晶 单位:新疆医科大学附属中医医院药研室; 乌鲁木齐830000; 新疆维吾尔自治区药物研究所药剂室; 乌鲁木齐830004
摘要:目的研究刺山柑总生物碱对系统性硬皮病(SSc)小鼠Ⅰ型胶原α1链(COL1A1)、纤维连接蛋白(Fn)、血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)和白细胞介素-1β(IL-1β)等皮肤纤维化相关指标的影响。方法 90只BALB/c小鼠随机分为对照组、模型组、青霉胺组及刺山柑总生物碱低、中、高剂量组,每组15只。除对照组外,其余各组小鼠背部注射盐酸博莱霉素建立SSc模型,成模后刺山柑总生物碱组小鼠背部外敷刺山柑总生物碱乳膏,青霉胺组给予青霉胺灌胃,对照组、模型组背部外敷不含药基质。末次给药后,Western blot检测皮肤COL1A1表达,ELISA法测定小鼠皮肤Fn和血清AngⅡ、IL-1β水平。结果刺山柑总生物碱中、高剂量可明显降低小鼠皮肤COL1A1表达,刺山柑总生物碱高剂量可降低SSc小鼠皮肤Fn和血清AngⅡ水平(P〈0.05),对IL-1β没有明显影响(P〉0.05)。结论刺山柑总生物碱可抑制SSc皮肤组织COL1A1和Fn表达,调节AngⅡ的异常升高,改善SSc皮肤纤维化。
作者:王斌; 张燕; 金苏华; 珍妮 单位:内蒙古林业总医院医学影像科; 内蒙古牙克石022150; 内蒙古林业总医院眼科; 内蒙古牙克石022150; 内蒙古林业总医院医学影像科核磁共振室; 内蒙古牙克石022150
摘要:目的分析重组hIL-10联合威灵仙总皂苷对佐剂性关节炎大鼠(AA大鼠)关节影像学表现的影像及其影响的机制。方法将150只大鼠分为空白组、对照组、观察组1、观察组2、观察组3。空白组不接受任何干预。对照组仅接受关节炎模型建立干预。3个观察组大鼠除接受佐剂型关节炎模型建立干预外,分别接受威灵仙总皂苷治疗,重组hIL-10治疗和重组hIL-10联合威灵仙总皂苷治疗。于实验第0、15、35天分别行X线检查关节间隙和关节评分;35d后处死大鼠,取动脉血检测其淋巴细胞和血清炎症因子。结果实验15d后对照组和3个观察组骨侵蚀关节侵蚀评分显著高于空白组,关节间隙显著减小(P〈0.05);实验35d后观察组小鼠骨侵蚀关节侵蚀评分显著低于对照组,关节间隙显著大于对照组(P〈0.05)。观察组3CD4+T细胞、CD4+/CD8+、IL-17A、IL-6和TNF-α显著低于对照组和观察组1、2(P〈0.05)。结论重组hIL-10联合威灵仙总皂苷可以通过调节免疫有效保护AA大鼠关节。
作者:李宝新; 郭淑芹; 张灿; 常文龙; 王翯; 姚琪; 张云良 单位:河北省保定市第一中心医院内分泌科; 071000
摘要:目的探讨不同体质量指数(BMI)的2型糖尿病患者血清瘦素和神经肽Y的水平变化和意义。方法 195例2型糖尿病患者根据BMI分为糖尿病正常体质量组(W1组)、糖尿病超重组(W2组)、糖尿病肥胖组(W3组),同期体检BMI正常的健康人群为对照组(W0组),ELISA方法测定各组血清瘦素和神经肽Y的水平,采用多元线性回归分析法评估二者与BMI、腰臀比(WHR)、血脂、血糖之间的相关性。结果 W3组血清瘦素水平明显高于其他组(P〈0.05),W2组和W1组血清瘦素水平均明显高于W0组(P〈0.05),但W2组和W1组血清瘦素水平无明显差别(P〉0.05);W3组和W2组神经肽Y水平显著高于W0组(P〈0.05),而W2组较W1组、W1较W0组神经肽Y水平虽有升高,但差异无统计学意义(P〉0.05)。影响血清瘦素水平最显著的因素为BMI、WHR、低密度脂蛋白胆固醇(LDL)、Ln[空腹胰岛素(FINS)]、Ln[胰岛素抵抗指数(HOMAIR)]和神经肽Y,影响血清神经肽Y水平最显著的因素为BMI、WHR、LDL、Ln(HOMA-IR)和瘦素。结论在2型糖尿病合并肥胖发生时血清瘦素和神经肽Y水平均有不同程度升高,且相互影响,可能共同在糖尿病合并肥胖的发病机制中起一定的作用。
作者:廖清池; 胡艳丽; 周胜华 单位:扬州大学附属苏北人民医院心内科; 江苏扬州225001; 中南大学湘雅二医院心内科; 湖南长沙410000
摘要:目的探讨microRNA-21(miR-21)在预测冠心病慢性闭塞病变(CTO)患者侧支循环是否良好中的作用。方法选取95例冠脉造影提示CTO的冠心病患者,根据患者冠脉侧支循环情况将其分为侧支循环良好组(53例)及侧支循环不良组(42例),选择冠脉造影正常的30例患者作为对照组,采用实时荧光定量PCR法检测miR-21水平,ELISA法检测缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)水平。Logistic回归分析法分析冠脉侧支循环形成的影响因素,应用接受者操作特征曲线(ROC曲线)评价miR-21对CTO病变患者冠脉侧支循环是否良好的预测效能。结果与冠脉侧支循环不良组相比,冠脉侧支循环良好组血浆miR-21及HIF-1α水平明显升高(P〈0.05);CTO病变组较正常冠脉组miR-21及HIF-1α水平明显降低(P〈0.05);miR-21水平与HIF-1α表达呈正相关(r=0.804,P〈0.05);miR-21(OR=4.762,95%CI为2.395~6.164,P〈0.05)及HIF-1α(OR=12.906,95%CI为11.774~15.048,P〈0.05)水平均为CTO冠脉侧支循环形成良好的预测因子;miR-21可有效区分CTO病变侧支循环是否良好(AUC为0.93,P〈0.05)。结论循环miR-21水平在CTO侧支循环良好组明显升高,可作为区分冠心病CTO病变患者侧支循环是否良好的生物标志物。
作者:郝发宝; 郭春宝; 张明满; 李英存; 康权 单位:重庆医科大学附属儿童医院/儿童发育疾病研究教育部重点实验室/儿科学重庆市重点实验室/重庆市儿童发育重大疾病诊治与预防国际科技合作基地肝胆外科; 400014
摘要:目的探讨儿童阑尾炎术后肠梗阻的发病情况及术后肠梗阻的复发转归情况。方法分析2005年1月至2016年1月该院住院的阑尾炎术后肠梗阻患儿共380例,分析不同类型阑尾炎术后肠梗阻发病率,肠梗阻发生后再次复发的情况,手术治疗相对于保守治疗对肠梗阻复发的影响情况。结果阑尾炎术后发生肠梗阻发病率为4%,第1、2、3次梗阻的复发率依次为23%、39%、53%。第1次梗阻后手术治疗的复发率为0.253,保守治疗的复发率为0.215(P=0.399);第2梗阻后手术治疗的复发率0.487,保守治疗的复发率为0.312(P=0.097);第3次梗阻后手术治疗的复发率0.636,保守治疗的复发率为0.478,差异均无统计学意义(P=0.385)。结论阑尾炎术后肠梗阻复发率随肠梗阻发生次数的增加而增加,保守治疗和手术治疗的复发率之间无明显差异。
作者:姚俊东; 张周龙; 王运昌 单位:河南科技大学/临床医学院/河南科技大学第一附属医院超声科; 河南洛阳471003
摘要:目的研究声脉冲辐射力弹性成像(ARFI)技术联合超声增强造影(CEUS)技术评估不同回声颈动脉粥样斑块(CP)易损性的应用价值。方法根据回声不同,将119例伴有CP患者分为低回声、等回声、混合回声及强回声CP组,依次进行常规颈动脉彩超、ARFI技术、CEUS检查,观察并分析斑块的尺寸、剪切波速度、增强强度及增强比率。结果不同斑块组间的剪切波速度差异有统计学意义(H=110.023,P〈0.01);不同斑块组间的增强强度差异有统计学意义(H=62.871,P〈0.01);不同斑块组间的增强比率差异有统计学意义(H=63.774,P〈0.01);增强强度与剪切波速度间呈正相关(P〈0.05);增强比率与剪切波速度间呈正相关(P〈0.05)。结论 ARFI技术及CEUS技术对于粥样斑块的易损性的评估价值有很高的相关性,都能够作为一种可靠的量化评估手段。
作者:王丽珺; 李文献; 谭放 单位:复旦大学附属眼耳鼻喉科医院麻醉科; 上海200031
摘要:目的比较帕洛诺司琼和格拉司琼预防眼球摘除义眼座植入术后恶心呕吐(PONV)的经济性和有效性。方法选择该院择期行眼球摘除义眼座植入术的患者70例,分为帕洛诺司琼组(P组,n=35)和格拉司琼组(G组,n=35)。P组麻醉诱导前给予帕洛诺司琼0.25mg,G组给予格拉司琼3mg。观察记录术后4、24、48、72h患者恶心呕吐发生的情况,同时记录与5-羟色胺受体拮抗药相关的药物不良反应及各组麻醉费用。结果眼球摘除义眼座植入PONV的发生延续至术后72h,且以Ⅱ、Ⅲ级为主。术后4h内两组PONV发生情况差异无统计学意义(P〉0.05);术后24、48h内P组患者PONV的发生明显少于G组,差异有统计学意义(P〈0.05)。术后4、24、48h帕洛诺司琼的成本效果比均优于格拉司琼(P〈0.05)。结论应用帕洛诺司琼预防眼球摘除义眼座植入术PONV,是一种经济有效的方法。
作者:李强; 姜华; 王汝良; 潘洪良 单位:牡丹江医学院附属红旗医院放射线科; 黑龙江牡丹江157011; 牡丹江医学院附属红旗医院设备科; 黑龙江牡丹江157011
摘要:目的探讨CT联合细胞膜糖蛋白(Endoglin)、血管生长因子(VEGF-C)及血清糖链抗原19-9(CA19-9)检测胰腺癌诊断的敏感性与特异性。方法选取2010年2月至2016年2月来该院进行治疗的胰腺病变患者,根据病理检测结果将其分为胰腺癌组(44例)和良性病变组(48例),另选40例健康人群作为对照组。对所有受试者进行CT检测,并测定其血清Endoglin、VEGF-C和CA19-9水平,计算联合诊断在胰腺癌诊断中的敏感性与特异性。结果胰腺癌组患者CT图像中出现病灶变形、边缘模糊和密度不均匀的比例显著高于非胰腺组患者和对照组受试者(P〈0.05);胰腺癌组患者血清Endoglin[5.78(3.95~9.27)μg/L]、VEGF[1 084.34(493.24~2 103.45)ng/mL]和CA19-9水平[58.34(31.02~90.34)U/mL]高于对照组和非胰腺癌患者(P〈0.05);联合诊断的敏感性和阴性预测率分别为97.72%和98.46%,与病理检查结果的一致性最高(Kappa=0.77,P〈0.01)。CT、Endoglin、VEGF-C和CA19-9单独诊断的AUC分别为0.760、0.860、0.860和0.670,四者联合诊断的AUC为0.892,高于单独检测(P〈0.05)。结论 CT联合Endoglin、VEGF-C及CA19-9检测用于胰腺癌诊断的敏感性优于CT和血清肿瘤标志物单独诊断的敏感性。