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作者:王芳; 王鹓臻; 王晶晶; 何芳 单位:宁夏医科大学总医院消化内科; 银川750004
摘要:目的探讨microRNA-19a/b(miR-19a/b)对人胃癌细胞的增殖和凋亡的影响及可能机制,并研究miR-19a/b的表达量与胃癌临床病理特征的关系。方法建立稳定过表达miR-19a/b的SGC7901细胞系,以MTT比色法及平板克隆形成实验检测转染miR-19a/b后细胞增殖变化、Annexin V-FITC/PI双染法检测细胞凋亡变化,Western blot检测ERK、P—ERK、AKT、P—AKT及PTEN的蛋白表达变化,实时定量PCR方法检测分析miR-19a/b与胃癌组织分化程度、TNM分期及淋巴结转移的关系。结果在SGC7901细胞中过表达miR-19a/b后产生以下效应:细胞增殖能力增加,MTT实验显示转染miR-19a及miR-19b后检测72h的细胞增殖能力与对照组相比分别增加2.2倍和1.6倍,平板克隆实验显示转染miR-19a及miR-19b后细胞的克隆形成能力与对照组相比分别增加3.6倍和3.0倍;细胞凋亡减少,转染miR-19a及miR-19b后细胞的凋亡能力与对照组相比分别降低53%和33%,与对照组相比,p—AKT、p—ERK蛋白表达水平增加,PTEN蛋白表达水平降低,差异具有统计学意义(P〈0.05)。在58例胃癌组织标本检测中,miR-19a/b的miRNA表达水平与年龄、性别、分化程度无关(P〉0.05),而与TMN分期、淋巴结转移成负相关(P〈0.05)。结论miR:19a/b可促进胃癌细胞增殖、抑制细胞凋亡,且与胃癌的TMN分期、淋巴结转移呈负相关。
作者:周学亮; 方义湖; 赵勇; 邹斌; 徐华; 吴起才; 刘季春 单位:南昌大学第一附属医院心脏大血管外科; 南昌330006
摘要:目的构建高滴度大鼠Hesl腺病毒干扰载体(Ad—Hesl—shRNA)。方法设计3对Hesl—shRNA寡核苷酸序列,通过定向克隆构建pHBAd—U6-CMV-Hesl-shRNA干扰质粒,将pHBAd—U6-CMV-Hesl-shRNA和pHBAd—BHG共转染293T细胞,以包装Ad—Hesl—shRNA,利用改进TCID50法进行病毒滴度测定。Ad—Hesl感染H9c2心肌细胞,Western blot检测Hesl表达。结果pHBAd—U6-CMV-Hesl—shRNA构建成功,Ad-Hesl—shRNA包装顺利,滴度为1.0×10^11PFU/mL,并可在H9c2心肌细胞内发挥干扰效应。结论Ad-Hesl-shRNA包装成功,在一心肌细胞中具有Hesl的干扰效应。
作者:赵帅; 董文斌; 李清平; 康兰; 雷小平; 周正颐 单位:西南医科大学附属医院新生儿科; 四川泸州646000
摘要:目的通过沉默Pin1表达观察高氧诱导人肺泡上皮细胞凋亡中组蛋白去乙酰化酶(SIRT1)核-浆穿梭改变。方法在体外常规培养A549细胞及A549-Pin1shRNA细胞,随机分为对照组(常规培养)和高氧组、A549-Pin1shRNA细胞组(均给予高体积分数氧诱导细胞)。密闭培养24h后,倒置相差显微镜下观察各组细胞形态改变;免疫组织化学方法检测各组细胞中Caspase3、p53蛋白在各组细胞中的表达情况;免疫荧光法定位SIRT1核-浆穿梭变化。结果对照组细胞生长状态良好,细胞呈梭形,活细胞数量较多。高氧组细胞生长状态差,细胞由原来的梭形变成椭圆形。A549-Pin1shRNA组细胞生长状态欠佳,贴壁欠佳,活细胞数量较高氧组有所增加,但是未达到对照组的水平。对照组密闭培养24h,高氧组、A549-Pin1shRNA组通氧后密闭培养24h后,对照组中Caspase3、p53表达最少,与高氧组相比,差异有统计学意义(P〈0.05);而A549-Pin1shRNA组在通氧后密闭24h,Caspase3、p53表达介于对照组与高氧组之间,与各组比较差异均有统计学意义(P〈0.05)。在免疫荧光法定位SIRT1核一浆穿梭改变中,对照组未见SIRT1核一浆穿梭改变,而A549-Pin1shRNA组较高氧组减少。结论抑制Pin1表达能够减少人肺泡上皮细胞凋亡中SIRT1核-浆穿梭。
作者:仲吉英; 张涛; 徐枫; 文先杰; 梁桦 单位:广东省佛山市第一人民医院麻醉科; 528000
摘要:目的观察鞘内注射右美托咪定对背根节慢性受压痛大鼠(CCD)脊髓CaMKⅡ表达的影响,探讨右美托咪定-CaMKⅡ通路在大鼠背根节慢性受压痛中的作用。方法鞘内置管成功的雄性SD大鼠48只,随机分为6组,每组48只。分别是正常对照组(C组);模型组(CCD组);生理盐水组(NS组);右美托咪定2μg/kg组(Dex2);右美托咪定4μg/kg组(Dex4);右美托咪定8μg/kg组(Dex8)。分别于鞘内置管前(T1),制备CCD模型前(T2)、CCD模型制备后5d鞘内给药前(T3)、鞘内给药后30min(T4)、60min(T5)、120min(T6)、240min(T7)检测大鼠机械缩腿阈值(MWT)和热缩足潜伏期(TWL)。并于鞘内给药后240min,各组取4只大鼠处死,取脊髓腰膨大,采用免疫印迹法检测CaMKⅡ的表达。结果与C组比较,CCD组大鼠在T3~T7各时点MWT及TWL均显著降低,CCD组大鼠表现为明显的机械痛敏感和热痛敏感。NS组大鼠鞘内注射NS后对大鼠MWT及TWL无影响,鞘内注射不同剂量的右美托咪定则可显著提高CCD大鼠MWT和TWL。与C组(0.24±0.04)比较,CCD组(0.59±0.09)、NS组(0.61±0.08)大鼠CaMKⅡ蛋白表达均显著增加;鞘内注射不同剂量的右美托咪定后,大鼠脊髓CaMKⅡ蛋白表达(0.45±0.06、0.39±0.05、0.36±0.06)增加幅度显著降低。结论鞘内注射右美托咪定可减轻CCD大鼠机械痛敏感和热痛敏感,抑制CCD大鼠脊髓CaMKⅡ蛋白表达。
作者:刘华; 刘义 单位:湖北省荆州市中心医院妇产科; 434020; 华中科技大学同济医学院附属协和医院妇产科; 武汉430022
摘要:目的探讨已婚育龄子宫脱垂妇女行微创高位宫骶韧带悬吊联合宫颈截除手术的短期和长期效果。方法共纳入50例荆州市中心医院诊断为Ⅲ度以上子宫脱垂妇女作为研究对象,采用随机数字法平均分为观察组与对照组,分别给予微创高位宫骶韧带悬吊联合宫颈截除手术治疗与单独微创高位宫骶韧带悬吊治疗,术后随访3年,比较两组盆腔器官脱垂定量分度法(POP-Q)评估差异,并采用中文版健康调查简表(SF-36)与盆腔器官脱垂/尿失禁性功能问卷(PISQ-12)对其远期生活质量及性功能进行评价。结果术后6个月观察组无阴道肿物脱出,下坠感均有明显好转,而对照组有1例出现阴道肿物脱出,3例有明显下坠感;术后均无输尿管扭曲、膀胱或直肠损伤、盆腔血肿等并发症。术后两组患者除阴道总长度(TVL)外,其余POP-Q各指示点位置与术前比较差异均有统计学意义(P〈0.05);且观察组距处女膜3cm的阴道前壁处、宫颈或子宫切除的阴道残端及后穹窿(未切除子宫者)指示点位置明显好于对照组,差异有统计学意义(P〈0.05)。术后两组患者SF-36评分及PISQ-12评分均有明显改善,与术前相比差异有统计学意义(P〈0.05),且观察组情感得分较对照组改善更明显(P〈0.05)。结论微创高位宫骶韧带悬吊联合宫颈截除手术可以有效改善已婚育龄子宫脱垂妇女临床症状。
作者:黄桃; 何发明; 郭睿; 米洁 单位:重庆医科大学附属第一医院重症医学科; 400016
摘要:目的研究经鼻高流量湿化氧吸入疗法(HHFNC)对急性低氧性呼吸衰竭的疗效。方法选择该院重症医学科2015年4月至2015年10月收治的41例行氧吸入疗法治疗的急性低氧性呼吸衰竭患者。随机分成面罩法(FM)组(n=10)、HH-FNC组(n=15)和无创正压通气(NPPV)组(n=16)进行治疗。分别监测治疗前与治疗2h后呼吸频率、血气分析、血流动力学指标及评价口腔干燥度和舒适度状况。结果3组治疗2h后PaO2均显著高于治疗前(P〈0.05)。治疗2h后NPPV组PaO2显著高于HHFNC组和FM组(P〈0.05),并且HHFNC组显著高于FM组(P〈0.05)。FM组口腔干燥度显著高于NPPV组和HHFNC组(P〈0.05)。HHFNC组舒适度显著高于NPPV组和FM组(P〈0.05),并且治疗2h后显著高于治疗前(P〈0.05)。结论HHFNC是治疗急性低氧性呼吸衰竭的一种比较理想的方法。
作者:彭亚琪; 蔡瑜娇; 江恩来; 孙立华 单位:第三军医大学新桥医院普通外科; 重庆400037
摘要:目的观察Claudin-1在乳腺癌组织中的表达与临床病理特征的关系,探讨Claudin-1的胞外区Cldn-1 50~80片段在乳腺癌转移中的作用机制。方法(1)应用免疫组织化学技术检测108例乳腺癌标本中Claudin-1的表达情况,并分析其与乳腺癌淋巴结转移、TNM分期和分子分型间的关系;(2)在乳腺癌细胞株中掺入Cldn-1 50~80片段,应用Western blot技术检测紧密连接蛋白Claudiml、Claudin-2的表达。结果(1)以是否淋巴结转移、临床分期、分子分型等病理特征为依据分组中,Claudin-1的表达强度在淋巴结转移组(χ^2=6.279,P=0.012)、TNM分期Ⅲ、Ⅳ期(χ^2=7.419,P=0.024)及分子分型为Her-2过表达型(χ^2=10.830,P=0.013)组中显著降低,差异有统计学意义;(2)Cldn-1 50~80片段的掺入可导致乳腺癌细胞中紧密连接蛋白Claudin-1及Claudin-2的表达下降,在转移性高的乳腺癌细胞株MDA-MB-231中,这种抑制作用更为显著。结论紧密连接蛋白Claudin-1的表达降低与乳腺癌的进展和转移密切相关,而Cldn-1 50~80片段通过调控紧密连接蛋白的表达在乳腺癌细胞侵袭、转移过程中发挥重要作用。
作者:刘飞; 张鹏; 吴淡娟; 赵明海; 纪婷婷 单位:南方医科大学南方医院检验科; 广州510515
摘要:目的应用核磁共振(NMR)波谱学的代谢组学方法,检测中医体质分类中阳虚体质与平和体质的血浆代谢物,研究阳虚体质中特征代谢物的特点。方法收集阳虚体质与平和体质各8例的血液样品,采用横向豫驰时间的分布曲线磁共振脉冲序列(CPMG)采集血液样品数据,观测血浆中的小分子代谢物。用多元统计分析方法比较阳虚体质组与平和体质组血浆内源性差异代谢产物。结果血浆中的代谢产物,与平和体质组相比,在阳虚体质组中乳酸(shift1.33;t=-3.018)、低密度胆固醇脂蛋白(shift 1.26;t=-2.849)、脂肪酸(shift 2.25;t=-3.325)、氧化三甲胺(shift 3.26;t=-5.217)、N-乙酰糖蛋白(shift2.03;t=-4.684)水平都有不同程度下降;而磷脂酰胆碱(shift3.22;t=3.901)、葡萄糖(shift 3.42;t=3.390)与谷氨酰胺(shift 2.12;t=5.177)水平都有不同程度升高。结论阳虚、平和体质不仅存在体内生物合成与分解中能量代谢、糖代谢、脂代谢、氨基酸代谢等的差异,也存在神经递质、脏腑功能的改变。
摘要:1.统计学符号:按GB3358—1982《统计学名词及符号》的有关规定,统计学符号一律采用斜体。2.研究设计:应告知研究设计的名称和主要方法。如调查设计(分为前瞻性、回顾性或是横断面调查研究),实验设计(应告知具体的设计类型,如自身配对设计、成组设计、交叉设计、析因设计、正交设计等),临床试验设计(应告知属于第几期临床试验,采用了何种盲法措施等);主要做法应围绕4个基本原则(重复、随机、对照、均衡)概要说明,尤其要告知如何控制重要非试验因素的干扰和影响。
作者:王旭; 陈宝华; 张彩娣; 董乔菁; 史建平 单位:南通大学第三附属医院呼吸科; 江苏无锡214041
摘要:目的探讨黄芪对急性加重期慢性阻塞性肺疾病(COPD)患者免疫功能的影响。方法将2014年4月至2015年8月该院明确诊断的急性加重期COPD患者随机数字表法分成治疗组和对照组,均接受临床常规治疗,治疗组加用黄芪治疗,于入院1d(治疗前)、7d及14d检测血免疫细胞(Th、Tc、NK、Treg及B细胞),同时在吸入支气管扩张剂后予肺功能检测,记录指标一秒用力呼气容积(FEV1)和流速(FEV1/FVC),观察以上指标的改变。结果治疗组及对照组NK、B细胞及Th/Tc均较治疗前有显著升高(P〈0.05),而Treg较治疗前显著下降(P〈0.05);同时治疗组Th/Tc比值、NK细胞显著高于对照组(P〈0.01),Treg较对照组显著降低(P〈0.01),而B细胞较对照组差异无统计学意义(P〉0.05)。治疗组及对照组肺功能指标FEV1和FEV1/FVC在治疗14d时与治疗前比较均现显著增高(P〈0.05),且治疗组均显著高于对照组(P〈0.05)。结论黄芪能改善急性加重期COPD患者的免疫功能。
作者:肖爽; 石淑兰; 赵庆华; 杜彪; 吴雷; 徐芳 单位:重庆医科大学附属第一医院护理部; 400016; 重庆医科大学附属第一医院附属酉阳医院护理部; 409800
摘要:目的运用持续改善(Kaizen)方法,进一步深化优质护理服务。方法通过现场查看,收集资料,访谈找出根本原因,利用流程再造等方法进行持续改善,并将改善后流程制作标准化清单,在全院进行推广。结果经过3个月临床持续改善发现,护士工作中步数减少,呼叫铃次数减少,患者满意度和护士满意度均提升,差异有统计学意义(P〈0.05),制定出三类标准化清单并在全院推广。结论运用持续改善(Kaizen)方法,可消除某一阶段的问题,再将改善过程通过清单制作出管理标准,在全院推广的做法有益于优质护理服务的进一步深化。
作者:卢振如; 黄显龙; 邹兴红 单位:重庆市人民医院放射科; 400014
摘要:目的探讨CT征象在甲状腺结节诊断中的意义。方法回顾性分析经手术病理确诊的30例甲状腺结节(38个结节)的CT平扫及三期增强扫描图像,由2名及以上高年资医师就所有CT征象进行判读,结合病理资料,分析甲状腺结节CT各征象对定性的价值。结果33个良性结节表现为境界清晰,有完整或不完整强化包膜,结节实性部分明显强化,有未强化囊变坏死区,强化时间密度曲线27个为流出型,6个良性结节因囊性部分多,实性部分少,无法准确测量CT值无法分型,4个结节出现钙化,形态为斑状、结节状、环状粗钙化,1例甲状腺多发结节患者颈部Ⅵ区出现相N表现形式结节;5个恶性结节表现为边缘模糊结节,无包膜,时间密度曲线为缓升平台型,3例有区域性淋巴结转移,2个结节出现钙化,为斑点状成簇分布钙化。结论依据有无淋巴结转移判定甲状腺结节良恶性是首要指标;结节边界、有无包膜、钙化形态、时间密度曲线等CT征象是进行甲状腺结节良恶性鉴别的有效方法。
作者:祖国亮; 尹康; 欧阳松茂; 刘晓峰; 朱宏泉 单位:赣南医学院第一附属医院重症医学科; 江西赣州341000
摘要:目的了解急性呼吸窘迫综合征(ARDS)患者肺复张时的急性血流动力学变化,并对比研究肺复张对肺内/外源性ARDS患者心脏和血流动力学影响的差异。方法根据病情需要,采用控制性肺膨胀法对该院重症医学科收治的22例血流动力稳定、无心脏疾病并接受机械通气的ARDS患者进行肺复张,其中肺内源性组(ARDSp)10例,肺外源性组(ARDSexp)12例,持续气道正压通气(CPAP)压力40cmH2O,维持30S,肺复张前及结束后30s立即使用M型超声探查双侧心室内径,三尖瓣收缩期位移(TAPSE),组织多普勒法了解左右心室的心肌收缩力。监测同一时间点血压、心率、中心静脉压力等指标。肺复张前及结束5min进行动脉血气分析。结果患者肺复张前后的氧合指数分别为(130±38)mmHg和(180±62)mmHg,比较差异有统计学意义(P〈0.01)。平均动脉压、收缩压、舒张压在复张终止时均发生下降(P〈0.05),稍后恢复正常。左心室舒张未内径和右心室舒张末内径在肺复张结束时均下降,与基础水平差异有统计学意义(P〈0.01)。二尖瓣环前叶收缩期运动峰值速度(SM)在复张前后无明显波动(P〉0.05)。通过对比研究发现平均血压变化和患者的左室舒张末期内径变化百分比具有相关性(r=0.61,P〈0.01)。ARDSp组和ARDSexp组组问比较肺复张前后心率、血压、心室内径、SM变化差异无统计学意义(P〉0.05)。结论肺复张过程中观察到短暂的平均血压的下降,其与心脏前负荷的改变显著相关。
作者:黄富礼; 周祖模; 刘伟; 孙峰; 黄何清; 吴刚; 金嘉琳 单位:西南医科大学附属医院感染科; 四川泸州646000; 浙江诸暨市人民医院感染科; 311800; 杭州市疾病预防控制中心; 310021; 复旦大学附属华山医院感染科; 上海200040
摘要:目的运用分子线性探针技术(MTBDRplus)对2个月末涂片阳性的初治肺结核患者进行快速耐药检测及个体化治疗指导,并观察其预后。方法选择基线及2个月朱痰涂片仍为阳性的初治肺结核患者随机分两组,分别予以传统直接观察(或面视)下的短程化疗(Directly Observed Treatment+short course chemotherapy,DOTs)方案及分子药敏指导治疗,并比较预后。结果在分子药敏指导治疗组中成功率,完全敏感的为74.4%,单耐异烟肼为87.5%,单耐利福平100.0%,耐多药结核75.0%;DOTs方案组中,成功率为单耐异烟肼25.0%,单耐利福平耐和耐多药结核均为0.0%。两组预后χ^2分析显示差异有统计学意义(P=0.044)。结论MTBDRplus应用在2个月末涂阳初治肺结核患者中可改善预后。
作者:肖文秀; 聂欢; 张崔晋怡; 白艳; 唐德谊; 蒋平; 赵攀; 黄成瑜 单位:重庆市公共卫生医疗救治中心感染科; 400038; 重庆市公共卫生医疗救治中心项目办; 400038; 重庆市公共卫生医疗救治中心科教科; 400038
摘要:目的统计分析该中心2004~2014年治疗人类免疫缺陷病毒感染者/艾滋病患者(HIV/AIDs)的抗病毒治疗(ART)情况。方法采用回顾性研究,通过中国疾病预防控制信息系统中的艾滋病综合防治信息系统收集HIV/AIDs的ART数据信息并进行分析。结果2004~2014年累计治疗1856例艾滋病患者,对其随访情况进行统计,在治患者87.0%,死亡0.6%。根据纳入和删除标准,最终研究分析1504例病例,男84.2%,女15.8%;平均年龄(39.17±13.36)岁;75.8%患者通过性接触途径感染;79.7%患者基线CD4小于350个/μL。免疫学效果分析显示,同基线时相比,不同治疗时间病例的CD4淋巴细胞计数均明显升高,差异均有统计学意义(均P〈0.05)。治疗时间为1~2年的患者,CD4淋巴细胞平均增加149.8个/μL。病毒学效果分析显示,接受治疗的HIV/AIDs最近一次病毒载量(VL)检测结果中,1460例(占97.1%)小于400copy/mL,病毒得到抑制。接受ART0~6、6~12、12~24年时,病毒抑制率分别为90.0%、94.5%、98.2%。结论该中心收治HIV/AIDs例数日趋增长,但病毒学抑制率较高、免疫学应答较好,在重庆市ART中取得了较好的成绩。