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作者:陈正堂 单位:第三军医大学新桥医院全军肿瘤研究所; 重庆400037
摘要:2006年,世界卫生组织(WHO)正式公布把肿瘤纳入慢性病范畴。也就是说,昔日被视为“绝症”的癌症,如今已成为可控制的慢性病。这一概念是在什么情况下提出来的?对肿瘤的临床诊治和预防有何影响?本文结合我市肿瘤界近期开展的有关工作,就此进行简略评述。
作者:李琼; 王阁; 王红中; 杨志祥; 单锦露; 陈川; 张志敏; 许文; 王东; 李增鹏 单位:第三军医大学大坪医院肿瘤中心; 重庆400042
摘要:目的建立HepG2人肝癌细胞株与LO2正常肝细胞株microRNA(miRNA)表达的差异谱,为研究miRNA在肝细胞癌变机制中的作用提供新线索。方法体外培养HepG2人肝癌细胞和LO2人正常肝上皮细胞,Trizol法抽提细胞总RNA,Ambion’s miRNA Isolation Kit进一步分离miRNA;利用基因芯片技术,将细胞miRNA与哺乳动物miRNA芯片杂交,采用Lux-Scan3.0图像软件和SAM version2.1进行数据分析。结果HepG2细胞与LO2细胞表达的miRNA中有146个存在着明显差异(fold change〉4.0),其中80个低表达和66个高表达,最高fold change达36倍,部分miRNAs与肿瘤关系密切,其中has-miR-224为肝癌癌变相关miRNA。结论HepG2较LO2细胞miRNA低表达数多于高表达数,反映其基因表达数量更丰富,细胞代谢和增殖更活跃;部分miRNAs可能参与肝细胞癌变分子机制。
作者:谢启超; 王玲俐; 朱波; 王亚丽; 顾健滕; 陈正堂 单位:第三军医大学新桥医院全军肿瘤研究所; 重庆400037
摘要:目的探讨吲哚胺-2,3-双加氧酶(indoleamin-2,3-dioxygenase,IDO)基因转染对小鼠Lewis肺癌细胞侵袭和转移能力的影响,并对其机制进行初步探讨。方法通过基因转染技术,利用阳离子脂质体将含有人全长ID0基因序列的真核表达质粒pEGFP—IDO转染到小鼠Lewis细胞,G418筛选获得Lewis—IDO细胞,设置空白对照组(Lewis细胞)及空质粒转染组(Lewis-EGFP细胞),观察细胞形态学改变,利用transwell侵袭小室检测3种细胞侵袭能力,将3种细胞分别种植到C57/LB小鼠,检测不同细胞种植瘤和转移灶的形成、小鼠外周血中调节性T细胞(Regulatory T cell,Treg)的增殖。结果与Lewis—EGFP细胞和Lewis细胞相比,Lewis—IDO细胞贴壁比例增加,形态变为长梭形,伪足明显增多延长,前二者形态相似;Lewis—IDO细胞侵袭能力增强,破坏matrigel基质蛋白胶层进入下室内的细胞数明显增多,Lewis—IDO细胞、Lewis-EGFP细胞及Lewis细胞分别为237.4±22.1、166.0±14.2和185.6±19.5,前者与后二者比较差异具有统计学意义(P〈0.05);种植Lewis—IDO、Lewis—EGFP及Lewis细胞的小鼠发生肝肺转移的小鼠数量及转移灶分别为12只44处、5只7处及4只7处,前者与后二者比较具有统计学意义(P=0.01);流式细胞术分析,种植Lewis—IDO细胞的小鼠外周血中Treg细胞比例明显高于Lewis—EGFP细胞组和Lewis细胞组,其比例分别为(13.7±4.5)%、(8.9±3.3)%和(9.2±3.4)%,前者与后二者比较差异具有统计学意义(P〈0.05)。结论IDO基因转染能改变Lewis细胞的培养形态,可以明显增强Lewis细胞的侵袭能力和转移能力,其机制可能与ID0对Lewis细胞形态学改变及诱导Treg细胞的增殖有关。
作者:王俊; 郭燕; 章必成; 关华军; 陈正堂 单位:第三军医大学新桥医院全军肿瘤研究所; 重庆400037
摘要:目的构建小鼠同源的人抗原R(HuR)基因真核表达载体,观察HuR过表达对Lewis肺癌(LLC)细胞增殖和侵袭的影响。方法从LLC细胞中抽提总RNA,RT—PCR扩增HuR cDNA,基因工程方法将PCR片断克隆至真核表达载体pEGFP—N1的多克隆位点。重组质粒经EcoRI和SmaI双酶切鉴定和测序后,使用Lipofectamine^TM2000转染LLC细胞。Western bloting检测HuR在细胞中的表达。MTT和Transwell系统分别检测细胞增殖和侵袭能力。结果经酶切、测序鉴定,小鼠HuR基因正确插入到pEGFP—N1的多克隆位点,获得pEGFP—HuR;Western blotting显示转染组与未转染组比较,HuR蛋白表达、LLC细胞增殖能力和侵袭能力均显著增强。结论HuR过表达可提高肿瘤细胞的增殖和侵袭能力。
作者:陈川; 王阁; 郑继军; 杨志祥; 单锦露; 张志敏; 许文; 李琼; 李增鹏; 王东 单位:第三军医大学大坪医院野战外科研究所肿瘤中心; 重庆400042
摘要:目的研究Src抑制荆PP2对人肝癌细胞HepG2中Src及Tec(tyrosine kinase expressed in hepatocellular carcinoma)的作用。方法用免疫细胞化学方法检测Src、Tec在HepG2细胞中的表达;RTPCR和Western blot方法检测不同浓度PP2处理细胞后,HepG2细胞中Src、Tec mRNA及蛋白表达;并用细胞黏附实验及MTT法检测PP2对细胞黏附及生长的影响。结果Src、Tec在人肝癌细胞HepG2中均呈高表达、用Src抑制剂PP2处理HepG2后,Src、Tec mRNA及蛋白表达明显降低,且细胞黏附能力及生长明显被抑制,并呈剂量依赖性,PP2浓度为40μg/ml时细胞抑制最明显。结论Tec是肝癌信号转导过程中重要的联接和调控分子.与Src存在cross-talk,抑制Tec可能影响肝癌细胞的生长和侵袭等生物聋行为。
作者:张志敏; 王阁; 杨志祥; 单锦露; 陈川; 许文; 李琼; 王东; 李增鹏 单位:第三军医大学大坪医院肿瘤中心; 重庆400042
摘要:目的建立改良型DEN诱发大鼠肝癌模型,探讨肝细胞癌变过程中的超微结构变化特点。方法用1%DEN溶液喂养Wistar大鼠诱发肝癌,在诱癌过程中给予大鼠3周休息间歇期,对不同诱癌阶段大鼠肝脏的超微结构进行动态观察。结果16周后诱癌组大鼠成癌率为96%(24/25),不同时期肝细胞核、核仁及胞质内细胞器的病理形态学改变有一定规律,观察到肝细胞吞噬细胞现象。结论设立间歇期提高了大鼠诱癌末期的成活率,但没有延长DEN诱癌的进程。该模型是动态研究肝癌发生的理想动物模型。肝细胞在癌变过程中出现变性、异型、吞噬细胞、恶变成癌细胞等超微结构特征。
作者:郭学光; 陈正堂 单位:第三军医大学新桥医院全军肿瘤研究所; 重庆400037
摘要:目的检测CCR7在非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)组织中的表达,并分析其与肺癌临床病理参数间的关系,探讨CCR7在NSCLC淋巴结转移中的作用。方法选用65例NSCLC临床切除组织石蜡标本,以免疫纽化SP法检测CCR7蛋白的表达。结果65例肺癌组织中,CCR7阳性表达37例,阳性率为56.9%(37/65),且其表达与淋巴结转移存在非常显著相关性(P〈0.01)。结论CCR7在NSCLC组织中高表达,且其表达与NSCLC淋巴结转移密切相关。
作者:刘利; 王刚; 陈杰; 张晓兵; 刘泽军 单位:第三军医大学西南医院国际合作实验室; 重庆400038
摘要:目的检测3种白血病细胞Jurkat、Molt-4、HL-60的雌激素受体α(estrogen receptorα,ERaα基因启动子ERα-A、ERα—B CpG岛甲基化状态,初步探讨ERα启动子区的甲基化状态以及与白血病发病机制的可能联系。方法应用甲基化特异性PCR技术(MSP)检测3种白血病细胞株与正常人外用血单个核细胞ERα启动子区ERα-A和ERα—B启动子区CpG岛甲基化状态。结果白血病细胞株ERα—A和ERα-B均出现甲基化条带,为全甲基化状态;正常人外周血单个核细胞ERα—A和ERα—B CpG岛呈现非甲基化状态。结论ERα基因启动子ERαA和ERα—BCpG岛的甲基化状态有可能成为白血病新的分子诊断标记物。
作者:王颖; 王渝东; 万跃; 谭兵; 吴永忠 单位:重庆市肿瘤研究所医学基础教研室; 400030; 重庆市医药高等专科学校; 400030
摘要:目的探讨不同浓度全反式维甲酸(all-trans-retinoicacid,ATRA)分化诱导对乳腺癌细胞的放射敏感性影响。方法MTT法检测细胞体外增殖能力,电镜形态学的观察,流式细胞仪进行细胞周期分析。结果全反式维甲酸分化诱导乳腺癌A431细胞株.细胞增殖能力下降,凋亡增加,更多的细胞被阻止于G1/G0期,放射敏感性增强。结论全反式维甲酸分化诱导能增强乳腺癌A431细胞株放射治疗敏感性,并与浓度成量效关系。
作者:敖绪军; 钱莘; 安江宏; 孙建国; 陈正堂 单位:第三军医大学新桥医院全军肿瘤研究所; 重庆400037
摘要:目的探讨小鼠Lewis肺癌(Lewis lung carcinoma,LLC)细胞株中Sca-1^+细胞的成瘤特性。方法以Sca-1作为磁珠分选细胞的表面标志,从LLC细胞中分离Sca-1^+细胞,流式细胞仪鉴定分离的纯度。将分选的Sca-1^+细胞、Sca-1^-细胞及未分选细胞分别以1×10^6、5×10^5、1×10^5、5×10^4、2×10^4密度接种于C57BL/6小鼠腋窝下,观察成瘤时间,4周后处死小鼠,统计成瘤率、平均瘤重及体积。结果分选前Sca-1阳性细胞百分比为(8.06±1.03)%,分选后Sca-1阳性细胞百分比为(93.92±1.07)%。Sca-1^+细胞组在2×10^4个细胞时可以成瘤,而Sca-1^-细胞组最少需要5×10^5个细胞。相同接种量(1×10^6),4周后处死小鼠,Sca-1^+细胞组的瘤重及体积均大于Sca-1^-细胞组(P〈0.01)。结论Sca-1^+细胞的成瘤性较Sca-1^-细胞强。
作者:卿毅; 仲召阳; 李增鹏; 关伟; 王佳; 杨宇馨; 王东 单位:第三军医大学大坪医院野战外科研究所肿瘤中心; 重庆400042
摘要:目的探讨多肿瘤标志物联合检测系统在胃癌诊断中的意义,建立联合诊断胃癌的判别诊断函数,以提高多肿瘤标志物诊断胃癌的准确率。方法对170例胃癌患者、112例胃部良性疾病患者及1203名正常体检者的12种常见肿瘤标志物检测结果及临床资料进行回顾性研究,分析比较单项指标及联合指标的阳性率,通过Fisher二分类判别分析建立判别诊断方程。结果用C-12芯片检测胃癌的灵敏度是50.00%,显著高于胃良性病变患者(34.82%)和健康体检者(10.59%)(P〈0.05),有诊断意义的指标是CA19-9、CEA、CA125、CA242和HGH(P〈0.05),前面3项指标联合检测的敏感度为44.12%,正确率为59.22%。建立胃癌诊断判别方程及分类诊断方程,胃癌诊断符合率为80.10%。结论用C-12多肿瘤标志物蛋白质芯片检测胃癌可提高诊断的灵敏度,优于单项肿瘤标志物;诊断判别函数可明显提高胃癌诊断的正确率,具有一定的临床参考价值。
作者:杨晓文; 崔明 单位:成都军区昆明总医院普外科; 昆明650032
摘要:目的探讨生存素(survivin)在乳腺癌组织中的表达情况及其与临床特征和生物学指标(Cyclind1、EGFr vⅢ)的关系。方法用免疫组织化学染色法分别对48例术前未行放、化疗的乳腺癌患者手术后的蜡块标本及16例癌旁组织进行Survivin、Cyclind1、EGFr vⅢ检测。结果肿瘤组织及癌旁组织中Survivin阳性率分别是66.7%(32/48)和6.3%(1/16),Cyclind1表达的阳性率分别为72.9%(35/48)和6.3%(1/16),EGFr vⅢ表达的阳性率分别为70.8%(34/48)和0%(0/16),肿瘤组织及癌旁组织之间的阳性率差异均有统计学意义,Survivin表达与Cyclind1及EGFR vⅢ表达呈正相关。结论Survivin在乳腺癌发生、发展中起一定作用。
作者:蒋明东; 李少林; 鄢勇; 王正洪; 方亮; 黄小波; 赵渝 单位:重庆市第九人民医院肿瘤科; 400700; 重庆医科大学核医学教研室; 400016
摘要:目的利用RNA干扰稳定筛选抑制技术,抑制人端粒酶逆转录酶(hTERT)基因表达.探讨靶向hTERT基因RNAi对肝癌细胞增殖的抑制效应。方法设计靶向hTERT基因的小干扰RNA,构建重组表达质粒pGenesil-shRNA-hTERT并导入人肝癌细胞系QGY细胞株,经G418筛选,建立稳定表达siRNA-hTERT的细胞株。采用real time RTPCR、MTT和PCR—TRAP法同时检测pGenesil—shRNA—hTERT稳定抑制纽和未处理QGY细胞组hTERT基因表达、端粒酶活性及细胞增殖变化。结果在稳定表达pGenesil-shRNA-hTERT的QGY细胞株中,RNAi效力持续、稳定存在,hTERT的mRNA表达、端粒酶活性明显降低,瘤细胞增殖被抑制。结论RNA干扰能持续、稳定地抑制靶基因hTERT的mRNA表达及肿瘤细胞增殖,是潜在的肿瘤基因治疗新方法。
作者:庞学利; 肖红; 李建军; 谭崇富; 王希; 曾勇; 邓鹏; 江湛 单位:第三军医大学西南医院肿瘤科; 重庆400038
摘要:目的探讨KV-X线CBCT在鼻咽癌调强放射治疗位置精度保证中的应用。方法采用瓦里安23EX影像引导直线加速器机载影像系统(OBI),在鼻咽癌患者调强治疗前分别行锥形束CT(CBCT)扫描,12例患者共扫描102次,系统自动与计划CT重建影像进行比较,获得在左右、腹背和头脚方向的位置误差数值,并校正之。结果本组治疗摆位精确度高,在左右、腹背和头脚方向的位置误差值分别为(0.25±1.22)mm、(0.16±0.95)mm和(0.08±0.78)mm。结论本组治疗准确可靠,KV—X线CBCT对于鼻咽癌调强放射治疗的高质量准确实施具有重要作用。
作者:杨镇洲; 王阁; 王东; 雷新; 周芊; 魏娜; 余娴; 马俊刚; 全晋 单位:第三军医大学大坪医院野战外科研究所肿瘤中心; 重庆400042
摘要:目的探讨脱氧葡萄糖正电子发射断层扫描(FDGPET)在鼻咽癌放射治疗后随诊中的临床价值以及与CT、MRI的互补作用。方法回顾性分析放射治疗后6~8个月、CT和MRI检查考虑鼻咽病灶复发的6例鼻咽癌患者,随后行FDG PET检查,并均作病理活检。结果6例CT和MRI提示肿瘤复发的鼻咽癌患者,PET显示其中2例有局灶性FDG代谢明显增高,经病理活检,证实仅2例FDG摄取浓聚的病变为肿瘤复发。结论与CT和MRI检查相比,FDG PET在鼻咽癌放射治疗后肿瘤复发的定性诊断上具有明显优势,若结合CT或MRI的影像结果分析,取得局部病变的结构与代谢改变复合信息,对后期局部复发病灶的精确适形放射治疗具有重要意义。