摘要:目的:探讨联苯双酯(dimethyl dicarboxylate biphenyl,DDB)对大鼠肝星状细胞HSC-T6增殖和凋亡及过氧化物酶体增殖物激活受体γ(peroxisome proliferator-activated receptor-gamma,PPARγ)表达的影响。方法:接种HSC-T6细胞于96孔板和6孔板中,分别用CCK-8法和流式细胞术测定不同浓度联苯双酯作用于细胞24 h后对细胞增殖和凋亡的影响;实时荧光定量PCR(Quantitative Real-time PCR,Q-PCR)和Western blotting分别检测药物对HSC-T6细胞PPARγm RNA和蛋白的表达的影响。结果:相比于对照组(0μmol·L~(-1)),DDB在实验浓度(8~64μmol·L~(-1))能明显抑制HSC-T6的增殖(P〈0.05),促进HSCT6的凋亡(P〈0.05);药物处理过的HSC-T6细胞PPARγm RNA及其蛋白表达均有显著提高。结论:DDB可通过上调HSCT6细胞中PPARγ的表达抑制细胞的增殖,促进细胞的凋亡。
摘要:目的:探讨并评价羟基氯喹(HCQ)体外抗肿瘤活性。方法:采用CCK-8法测定不同浓度HCQ(4.78,9.55,19.10,38.20,76.40μg·ml~(-1))对A549细胞、HepG2细胞、HT-29细胞、K562细胞、Hela细胞和B16细胞的抑制作用。用酶标仪检测吸光度(A)值并计算肿瘤细胞抑制率和IC_(50)。结果:与阴性对照组相比,不同浓度HCQ对6株肿瘤细胞的增殖抑制率均明显升高,且呈剂量依赖性(P〈0.01)。浓度达到38.20μg·ml~(-1)的HCQ对6株肿瘤细胞的抑制率均在60%以上。HCQ对肿瘤细胞的IC_(50)值分别为26.70(A549)、27.47(Hep G2)、5.72(HT-29)、14.03(K562)、20.21(Hela)、13.62(B16)μg·ml~(-1)。结论:HCQ对多种肿瘤细胞具有一定的体外抗肿瘤作用,在治疗肺癌、直肠腺癌、肝癌、宫颈癌、黑色素瘤和红白血病方面可能有良好的应用前景。
摘要:目的:评定HPLC-MS/MS测定人血浆中卡马西平(CBZ)浓度的不确定度。方法:分析HPLC-MS/MS法测定人血浆中CBZ浓度的不确定度来源,计算并进行合成和扩展。结果:人血浆中低浓度(7.46 ng·ml~(-1))和高浓度(745 ng·ml~(-1))CBZ的扩展不确定度分别为0.410 ng·ml~(-1)和33.400 ng·ml~(-1)(P=95%,k=2)。结论:HPLC-MS/MS法测定人血浆中CBZ浓度的不确定度在低浓度时主要由回收率、生物样品配制和基质效应引入,在高浓度时主要由生物样品配制和重复性引入。
摘要:目的:优选麻黄根总黄酮的提取工艺。方法:以麻黄根总黄酮的含量及收率为评价指标,对纯化方法进行优选,并在此基础上采用正交试验法优选出最佳工艺参数。结果:最佳纯化工艺为加8倍量50%乙醇搅拌20 min。结论:此工艺操作简便,重现性好,适合于大工业生产。
摘要:目的:探讨不同纯化技术对麦冬总皂苷水提液物理化学性质的影响。方法:采用正交试验优选麦冬总皂苷的水提工艺;采用大孔树脂吸附及膜分离等不同技术对麦冬皂苷水提液进行纯化,并测定其电导率、p H、黏度、浊度等理化参数及蛋白质、鞣质、多糖、总皂苷等物质的含量。结果:麦冬总皂苷的最佳水提工艺条件为:每次加6倍量水,煎煮3次,每次90 min;麦冬总皂苷不同纯化液的电导率、p H、黏度无显著影响,但总皂苷及3种大分子物质含量有显著差异。结论:大分子物质的含量可作为考察麦冬总皂苷水提液纯化工艺的参考指标;膜分离技术比大孔树脂吸附更适用于麦冬总皂苷水提液的分离纯化。
摘要:目的:研究乳癖消颗粒各提取部位的抗痛经作用。方法:采用缩宫素致小鼠扭体实验观察乳癖消颗粒各提取部位的抗痛经作用。结果:与模型组相比,乳癖消颗粒的各提取部位均能显著减少缩宫素引起的小鼠扭体反应次数(P〈0.05,P〈0.01或P〈0.001);其中,水溶性部位效果最好(P〈0.001),且与阳性对照组相比差异无统计学意义(P〉0.05)。结论:乳癖消颗粒的水溶性部位具有显著抗痛经作用。
摘要:目的:探讨用大孔吸附树脂法富集丁香叶抗菌有效部位。方法:以静态吸附与解吸附实验对大孔吸附树脂进行筛选。选定D101树脂进行分离工艺优化,包括树脂用量、径高比、洗脱流速、洗脱液浓度及用量等。结果:结果表明,最佳的条件为55%乙醇洗脱,吸附流速1 BV·h(-1),洗脱流速5 BV·h(-1),6 BV25%乙醇去除杂质,8 BV的55%乙醇洗脱得到有效部位。结论:提取液经D101树脂纯化后抗菌有效成分的含量达到65%以上,表明本方法适用于大规模制备丁香叶抗菌有效部位。
摘要:目的:通过Box-Behnken效应面法优化银线草中总黄酮的提取工艺。方法:以乙醇浓度(X_1)、液料比(X_2)和提取时间(X_3)为自变量,以银线草中总黄酮的提取量(Y)为因变量,利用Box-Behnken效应面法优化银线草中总黄酮的提取工艺。结果:银线草中总黄酮的最佳提取工艺参数为:乙醇浓度为54.8%,液料比为13.6,提取时间为2.0 h,通过3批验证提取工艺参数,银线草中总黄酮的提取量实测值与回归模型预测值的相对误差为-2.34%。结论:使用Box-Behnken效应面法优化银线草中总黄酮的提取工艺,方法简便,精度更高。
摘要:目的:制备复方瑞芬太尼-丙泊酚微乳双效麻醉药,并考察复方瑞芬太尼-丙泊酚微乳对成犬的麻醉效果。方法:采用高压均质法制备复方瑞芬太尼-丙泊酚微乳,考察复方瑞芬太尼-丙泊酚微乳的粒径分布、Zeta电位、微观形态及复方瑞芬太尼-丙泊酚微乳对成犬的麻醉效果。结果:复方瑞芬太尼-丙泊酚微乳平均粒径为(217.6±48.2)nm,多聚分散系数为(0.212±0.032),Zeta电位为(-31.2±3.8)m V,透射电镜显示微乳粒径均一。药效学研究表明复方瑞芬太尼-丙泊酚微乳对成犬部分脾切除手术的麻醉诱导和麻醉维持过程具有较好的效果。结论:双效麻醉药复方瑞芬太尼-丙泊酚微乳具有良好的镇静、镇痛效果,有望用于临床。
摘要:目的:探讨3种中药提取物对体外培养人真皮成纤维细胞增殖及胶原合成的影响。方法:采用组织块法分离培养人真皮成纤维细胞,进行波形蛋白免疫组化鉴定。MTT法测定3种中药提取物作用后成纤维细胞的增殖能力,消化法检测培养液中羟脯氨酸的含量变化。结果:培养的细胞为典型的成纤维细胞形态,波形蛋白免疫组化呈阳性;冻存前后的人真皮成纤维细胞均具有较强的增殖能力;MTT检测结果显示培养72 h后,0.312 5~5.000 0 mg·ml(-1)芦荟凝胶提取物、0.156 3~2.500 0 mg·ml(-1)白芨提取物、0.075 0 mg·ml(-1)丹参多酚酸盐,具有明显促进人成纤维细胞增殖作用(P〈0.05,P〈0.01),且培养上清液中羟脯氨酸含量高于空白对照组(P〈0.01,P〈0.05)。丹参多酚酸盐对成纤维细胞增殖的影响与时间和浓度关系密切,随着培养时间延长,高浓度药物组对成纤维细胞由促进变为抑制作用。结论:芦荟、白芨、丹参提取物可通过促进人真皮成纤维细胞增殖以及羟脯氨酸等细胞外基质的分泌加速创面愈合。
摘要:目的:建立家兔血浆尼达尼布检测的高效液相色谱方法,研究尼达尼布在家兔体内的药动学。方法:采用ZORBAX SB-C18色谱柱为分离柱,以乙腈-0.1%三氟乙酸-水(35∶20∶45)为流动相,流速为1.0 ml·min(-1),检测波长为286 nm,柱温为35℃;以卡马西平为内标,血浆在碱性条件下经乙酸乙酯萃取后检测。雄性家兔6只,按20 mg·kg(-1)的剂量耳缘静脉注射给予尼达尼布;分别在给药前和给药后不同时间点耳缘静脉采集血液,分离血浆待测。用DAS 3.0计算药动学参数。结果:尼达尼布浓度在0.05~10.00μg·ml(-1)范围内线性关系良好(r=0.999 8);低中高三个浓度(0.10,2.50,7.50μg·ml(-1))的日内精密度RSD分别为5.55%、4.53%和2.74%,日间精密度RSD分别为6.15%、5.45%和3.15%;相对回收率分别为(98.50±5.47)%、(100.25±4.54)%和(99.94±2.74)%。6只家兔血浆尼达尼布浓度经DAS 3.0计算,尼达尼布的主要药动学参数如下:C_(max)为(3.01±0.35)μg·ml(-1),t_(1/2)为(4.38±1.53)h,AUC_(0-t)为(11.67±1.71)μg·h·ml(-1)。结论:该方法简便、快速、准确,适用于家兔血浆尼达尼布浓度的测定及其药动学研究。尼达尼布在家兔体内呈一级动力学消除。
摘要:目的:以多指标综合评分结合响应面法筛选最佳煎煮工艺。方法:以芍药苷含量和得膏率的综合评分为指标,采用2因素5水平的中心组合设计原理,考察液料比、煎煮时间、煎煮次数对十全大补膏制备工艺的影响。结果:采用Design Expert 8.0.6软件对数据进行分析,建立芍药苷含量和得膏率综合评分与考察因素二次回归方程数学模型,结合生产实际,筛选最佳工艺为液料比10.6 ml·g(-1)、煎煮时间96 min,煎煮3次。结论:优选的煎煮工艺科学、合理、稳定。
摘要:目的:分离和鉴定短梗五加果提取物中的三萜类化合物。方法:采用开口柱色谱和高效液相色谱进行系统的化学分离,使用1H-NMR、(13)C-NMR、HSQC和HMBC等波谱学手段,结合ESI-MS质谱确定其分子结构。结果:从短梗五加果提取物中分离得到8个三萜类化合物,分别鉴定为22-α-hydroxychiisanogenin(1),chiisanogenin(2),3-oxo-24-methylenecycloartan(3),mangiferonic acid(4),isomangiferolic acid(5),齐墩果酸(6),白桦脂醇(7),白桦脂酸(8)。结论:化合物3、4、5为首次从五加属中分离得到。
摘要:目的:研究地榆鞣质提取物的体外抗菌活性及其对金黄色葡萄球菌的抑菌机制。方法:采用牛津杯法和试管二倍稀释法测定地榆鞣质提取物的抗菌活性,并以金黄色葡萄球菌为供试菌,测定胞外碱性磷酸酶(AKP)、钾离子(K+)、可溶性蛋白含量,及菌体胞内和胞外总三磷酸腺苷酶(T-ATPase)含量;通过聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)观察蛋白谱带变化和通过透射电镜(TEM)观察菌体超微结构,从而阐述地榆鞣质的抗菌机制。结果:地榆鞣质能够有效抑制革兰阳性菌,而对革兰阴性菌无明显的抑制作用。地榆鞣质作用金黄色葡萄球菌后,菌悬液中AKP、K+、可溶性蛋白、DNA和RNA等大分子物质的含量比对照组显著增大;胞内和胞外ATP酶浓度发生显著变化;SDS-PAGE蛋白图谱结果表明,经地榆鞣质处理的菌体无明显的蛋白条带形成;透射电镜观察发现,菌体细胞完整性被破坏。结论:地榆鞣质在体外具有显著的抗菌活性,能够改变金黄色葡萄球菌细胞膜的通透性,并破坏细胞的完整性。
摘要:目的:观察巴马神酒对肾阳虚小鼠的影响,以及对正常小鼠交配能力及精子数量的影响。方法:观察巴马神酒对氢化可的松诱导的肾阳虚模型小鼠体重、体温、自主活动次数、耐寒能力、生殖器官脏器系数及抗脂质过氧化的影响,对去势性肾阳虚模型小鼠生殖器官脏器系数、免疫器官脏器系数及勃起功能的影响,以及对正常小鼠交配能力及附睾精子数量的影响。结果:巴马神酒能增加氢化可的松诱导的肾阳虚小鼠的体重、体温和自主活动次数,提高耐寒能力以及使精囊腺和前列腺、包皮腺、附睾的脏器指数上升,并提高血清中SOD含量和降低血清中MDA含量(与模型组比较,P〈0.05或P〈0.01);巴马神酒能使去势性肾阳虚小鼠的包皮腺及胸腺脏器系数有所提升,并缩短阴茎勃起潜伏时间(与模型组比较,P〈0.05);巴马神酒能提高正常小鼠的交配能力和附睾精子数量(与空白组比较,P〈0.05或P〈0.01)。结论:巴马神酒具有一定的补肾壮阳作用。